圣地亞哥德孔波斯特拉大學(xué)：3D打印海藻酸鈉鹽氣凝膠
時間：2024-09-14 09:13 來源：EFL生物3D打印與生物制造 作者：admin 閱讀：次
在本研究中，圣地亞哥德孔波斯特拉大學(xué)Carlos A. García-González團隊研究一種3D打印的UCNPs標(biāo)記的海藻酸鹽氣凝膠是一種有前景的診療植入物，能夠用于組織工程和生物成像。
圖1 UCNPs修飾氣凝膠的顯微分析
通過掃描電子顯微鏡（SEM）圖像展示了不同配方的UCNPs裝飾的氣凝膠的微觀結(jié)構(gòu)，包括純海藻酸鹽氣凝膠（Alg UCNPs 0.4、Alg UCNPs 0.8和AlgHA UCNPs 0.4）的形態(tài)，揭示了UCNPs在氣凝膠多孔結(jié)構(gòu)中的均勻分布。圖像表明，UCNPs的加入并未破壞氣凝膠的完整性和多孔性，反而形成了一個光滑且開放的多孔網(wǎng)絡(luò)，這對于保持氣凝膠的生物相容性和促進細胞生長的特性至關(guān)重要。此外，通過能量色散X射線光譜（EDX）分析確認了UCNPs在氣凝膠中的存在，且UCNPs的粒徑分布分析顯示了合成后和加入氣凝膠后尺寸的一致性。這些結(jié)果證明了UCNPs成功整合到氣凝膠中，且保持了其物理化學(xué)穩(wěn)定性。
圖2 不同氣凝膠配方的細胞研究
通過WST-1實驗評估了與不同氣凝膠配方接觸后BALB/c 3T3細胞的活性，結(jié)果顯示細胞活性在24小時和48小時后與陽性對照組相比沒有顯著差異，證明這些氣凝膠對細胞無毒性，具有良好的生物相容性。此外，對人類骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）的粘附情況進行了評估，DAPI染色的共聚焦顯微鏡圖像顯示，無論是UCNPs標(biāo)記的還是未標(biāo)記的氣凝膠，MSCs的粘附情況相似，表明UCNPs的加入并不影響細胞的粘附。這些結(jié)果強調(diào)了UCNPs標(biāo)記的氣凝膠作為生物材料在細胞培養(yǎng)和組織工程應(yīng)用中的潛力。
圖3 不同氣凝膠制劑(分別為Alg, Alg UCNPs 0.8或AlgHA UCNPs 0.4)皮下植入一周后的測試
如圖3所示，匯總了小鼠和大鼠在不同氣凝膠配方（Alg、Alg UCNPs 0.8和AlgHA UCNPs 0.4）皮下植入1周后，血漿中腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素6（IL-6）和白細胞介素10（IL-10）的表達水平以及主要器官（脾臟、肝臟和腎臟）的組織指數(shù)。結(jié)果顯示，所有實驗組的TNF-α和IL-10水平與對照組相比沒有顯著差異，且IL-6的水平未檢測到，這表明植入的氣凝膠引發(fā)了低水平的炎癥反應(yīng)。組織指數(shù)的測定也未顯示出統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異，表明植入的氣凝膠沒有對主要器官造成毒性。此外，3c圖像顯示了植入后1周在植入部位形成的結(jié)締組織囊，這表明了氣凝膠植入后的局部組織反應(yīng)。這些結(jié)果綜合反映了UCNPs標(biāo)記的氣凝膠在體內(nèi)的生物相容性和安全性。
圖4 通過HE染色獲得不同組織的組織學(xué)圖像
通過H&E染色展示了小鼠和大鼠在皮下植入不同氣凝膠配方（Alg、Alg UCNPs 0.8和AlgHA UCNPs 0.4）1周后，皮膚、脾臟、肝臟和腎臟組織的組織學(xué)圖像。這些圖像顯示了植入部位的皮下肉芽腫性炎癥反應(yīng)，主要由富含巨噬細胞、淋巴細胞和漿細胞的炎癥細胞浸潤組成。對照組（未植入支架的動物）顯示出最小的瘢痕反應(yīng)，這與手術(shù)切口引起的輕微炎癥反應(yīng)一致。研究中未觀察到重大的組織異常，植入氣凝膠周圍的組織反應(yīng)被認為是對植入物的預(yù)期的異物反應(yīng)的一部分。此外，植入的氣凝膠周圍的結(jié)締組織囊的形成表明了正常的傷口愈合過程，且未觀察到感染或炎癥跡象，進一步證實了UCNPs標(biāo)記的氣凝膠良好的生物相容性。
圖5 在745 nm的激發(fā)波長和840 nm的發(fā)射波長下獲得的熒光強度圖
使用了植入了標(biāo)記有UCNPs的海藻酸鹽氣凝膠的小鼠模型，在植入后的不同時間點（手術(shù)后立即、4小時、1天以及1周、2周和3周）利用熒光成像系統(tǒng)（IVIS®）捕捉圖像，研究者能夠?qū)崟r且非侵入性地監(jiān)測氣凝膠的熒光信號。結(jié)果顯示，熒光信號在植入部位均勻分布，并且在長達3周的監(jiān)測期內(nèi)保持穩(wěn)定，這證明了UCNPs標(biāo)記的氣凝膠可以作為可追蹤的植入物，用于長期監(jiān)測植入物在體內(nèi)的生物降解過程和位置。此外，僅在植入UCNPs標(biāo)記氣凝膠的小鼠的脾臟中檢測到微弱的熒光信號，這可能表明UCNPs在體內(nèi)的分布和代謝。這些發(fā)現(xiàn)突顯了UCNPs在生物成像中的應(yīng)用潛力，為開發(fā)新型的診療一體化植入物提供了科學(xué)依據(jù)。
全文總結(jié)
本文成功開發(fā)了一種3D打印的海藻酸鹽-羥基磷灰石氣凝膠，通過整合上轉(zhuǎn)換納米顆粒（UCNPs），實現(xiàn)了一種新型的多功能診療植入物。該氣凝膠不僅具備了優(yōu)異的生物相容性和促進組織再生的能力，而且利用UCNPs的熒光特性，實現(xiàn)了植入后的長期實時監(jiān)測。通過體外細胞實驗和體內(nèi)動物模型驗證了其安全性和有效性，展示了在組織工程和生物成像領(lǐng)域的巨大應(yīng)用潛力。
文章來源：
https://doi.org/10.1016/j.bioactmat.2024.07.033
(責(zé)任編輯：admin)
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