斯洛伐克嘗試3D打印的PLA支架進行骨再生
時間：2020-03-15 09:18 來源：中國3D打印網 作者：中國3D打印網 閱讀：次
中國3D打印網3月15日訊，斯洛伐克的研究人員正在進一步研究PLA在生物打印中的用途，并在最近發表的“用于骨骼組織工程的3D打印的基于聚乳酸的多孔支架：一項體外研究”中發表了他們的發現。該團隊以PLA支架的形式創建了樣品，評估了細胞毒性和生物相容性，其最終目的是組織骨組織工程以協助骨骼再生（最具挑戰性的領域之一）。研究人員就生物印刷和骨骼再生，創建各種結構，支架以及使用不同的印刷方法進行了廣泛的不同研究。PLA以前通常被使用過，而這里的研究人員使用的是商業上可買到的PLA支架，他們將樣品分為三個不同的組，每個組都經過以下預處理：
.完整的培養基
.牛胎血清
.人血
此外，研究小組從細胞毒性和生物相容性方面分析了骨膜來源的細胞。
廢舊材料的性質和印刷工藝的性質
支架是使用FFF 3D打印創建的，支架樣品為10*10*4 mm，孔隙率為61％。骨膜取自一名55歲女性患者的脛骨近端，該患者正在接受膝關節置換手術。得到了她的同意，位于科希策的路易斯·巴斯德大學醫院倫理委員會批準了這一程序。并在25 cm2培養瓶（T25）中接種25,000個細胞/ cm2，該培養瓶含有Alpha修飾的基本必需培養基（美國，Invitrogen，GIBCO®），并添加了10％的胎兒牛血清（FBS，Invitrogen，GIBCO®，美國）和1％的ATB，”研究人員解釋說。
5天后，通過更換培養基去除了非粘附細胞。將貼壁細胞在標準培養條件下于37°C的5％CO2濕潤氣氛中培養，每2-3天更換一次培養基。將匯合的細胞層用0.05％胰蛋白酶-EDTA溶液（美國，Invitrogen）解離，并通過TC10™自動化細胞計數器（Bio-Rad Laboratories）評估細胞的數量和活力。骨膜-來自第三代（P3）的骨祖細胞（PDO）-被用于流式細胞儀分析和與支架的共培養。”將支架滅菌，然后分成三組：“第一組在人血清中孵育，第二組在含有Alpha修飾的基本必需培養基的培養基中補充10％FBS和1％ATB，第三組在10％FBS中孵育。”
由FFF技術制備的印刷腳手架，通過計算機斷層掃描顯示
腳手架的輸出-腳手架的內部結構：
A）頂視圖（119％），B）右視圖（167％）
.完整的培養基
.牛胎血清
.人血
此外，研究小組從細胞毒性和生物相容性方面分析了骨膜來源的細胞。
廢舊材料的性質和印刷工藝的性質
支架是使用FFF 3D打印創建的，支架樣品為10*10*4 mm，孔隙率為61％。骨膜取自一名55歲女性患者的脛骨近端，該患者正在接受膝關節置換手術。得到了她的同意，位于科希策的路易斯·巴斯德大學醫院倫理委員會批準了這一程序。并在25 cm2培養瓶（T25）中接種25,000個細胞/ cm2，該培養瓶含有Alpha修飾的基本必需培養基（美國，Invitrogen，GIBCO®），并添加了10％的胎兒牛血清（FBS，Invitrogen，GIBCO®，美國）和1％的ATB，”研究人員解釋說。
5天后，通過更換培養基去除了非粘附細胞。將貼壁細胞在標準培養條件下于37°C的5％CO2濕潤氣氛中培養，每2-3天更換一次培養基。將匯合的細胞層用0.05％胰蛋白酶-EDTA溶液（美國，Invitrogen）解離，并通過TC10™自動化細胞計數器（Bio-Rad Laboratories）評估細胞的數量和活力。骨膜-來自第三代（P3）的骨祖細胞（PDO）-被用于流式細胞儀分析和與支架的共培養。”將支架滅菌，然后分成三組：“第一組在人血清中孵育，第二組在含有Alpha修飾的基本必需培養基的培養基中補充10％FBS和1％ATB，第三組在10％FBS中孵育。”
由FFF技術制備的印刷腳手架，通過計算機斷層掃描顯示
腳手架的輸出-腳手架的內部結構：
A）頂視圖（119％），B）右視圖（167％）
測量細胞四次并與對照組比較。結果產生了良好的生物相容性。然而，研究人員指出，在涂有人血清的支架中效果最好。這種處理還促進了細胞生長。
在與PLA支架共培養期間，骨膜來源的骨祖細胞的增殖分別通過CellTiter96®AQueous One Solution細胞增殖測定法分別在1、6、11和14天后測量。數據代表四個獨立測量的平均值±SD值，p的值在共培養的第一天為p <0.05（*），在共培養的其他天為p <0.01（**）
在培養兩周的過程中，還使用SEM觀察了人類PDO在天然PLA支架上的分布，粘附和增殖。人PDO在支架中顯示出良好的生存力，將其在人血清中孵育48小時，這通過增強的細胞擴散和增殖來表達，并且在14天后將支架和細胞共同培養的培養基的pH為7.4。 研究人員總結說：“ pH值達到了人類血液中pH值。獲得的PLA多孔支架有利于骨膜附著祖細胞和增殖，此外，細胞通過間質孔滲入支架，這對于細胞相容性評估很有意義。”
中國3D打印網點評：新的策略，例如通過使用支架，愈合促進因子和干細胞的綜合療法，以及最終的三維打印技術，雖然目前仍處于初步階段，但可能會在不久的將來提供新的令人興奮的替代方法。
(責任編輯：admin)
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